认识检查 | 基因异常无处藏！荧光原位杂交技术如何“点亮”骨髓纤维化的治疗之路

原创 MPN家园

2025年07月23日 18:20

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当被诊断为骨髓增殖性肿瘤（MPN），尤其是原发性骨髓纤维化（PMF）时，面对医生建议做一项名为“荧光原位杂交”（FISH）的基因检测，很多患者难免困惑：这是什么检查？为什么我要做？它贵吗？别担心，这项听起来“高深”的技术，实则是医生精准对抗MPN的重要武器。本文将为您揭开FISH在MPN诊疗中的神秘面纱。

一、技术探秘：FISH如何让基因“发光”？

想象一下，医生需要在浩如烟海的细胞中寻找特定的基因异常，如同在茫茫大海中寻找一枚特定的贝壳。荧光原位杂交技术（FISH）就是为此而生的“基因定位仪”。

它的工作原理巧妙而直观：荧光探针：科学家针对特定基因序列（如JAK2、CALR、MPL）设计出携带荧光标记的“探测器”（核酸探针）。

精准结合：探针进入细胞后，会严格遵循“碱基互补配对”原则^[1]，像磁铁一样牢牢吸附在目标基因的位置。

显影观察：在特殊荧光显微镜下，结合了探针的目标基因便会发出特定颜色的光（如红色、绿色）。医生通过观察信号的数量、颜色、位置，就能判断基因是否存在异常。

相比传统染色体核型分析，FISH具有速度快（数天出结果）、灵敏度高、特异性强的优势，能检测出微小、复杂的基因改变，在血液肿瘤诊断中不可或缺。

二、为什么骨髓纤维化患者

需要FISH检测？

原发性骨髓纤维化（PMF）是一种骨髓恶性克隆性增殖疾病，基因突变在其发病、进展和预后中扮演核心角色。2024版《荧光原位杂交技术在血液肿瘤中的应用规范》^[1]明确指出：FISH检测对PMF的诊断、预后分层至关重要。

精准诊断的“金钥匙”

鉴别诊断：PMF的症状（如乏力、脾肿大、贫血）与其他骨髓增殖性肿瘤（如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症）或骨髓增生异常综合征有重叠。

核心驱动基因检测：FISH可高效检测JAK2 V617F突变（约60%患者）、CALR基因突变（约25%–30%）、MPL基因突变（约5%–10%）。

排除其他异常：FISH还能帮助排除可能存在的伴随异常（如del(13q)、+8、del(20q)等），这些异常对诊断分型也有提示意义^[1]。

预测疾病走向的“风向标”

基因状态直接影响疾病风险和生存期。国际预后评分系统（IPSS、DIPSS等）都将基因突变类型纳入核心指标^[2]：

CALR 1型突变患者通常预后较好。

无JAK2/CALR/MPL突变（三阴性）或存在某些高危异常（如ASXL1突变、del(17p）的患者预后较差。

指导靶向治疗的“导航仪”

对于中高危PMF患者，JAK抑制剂（如芦可替尼）是重要的治疗选择。明确是否存在JAK2、CALR或MPL突变是启动靶向治疗的前提。

FISH检测能帮助医生确认患者是否适用这类药物，并监测治疗反应。

三、FISH报告单揭秘——看懂基因的“荧光信号”

拿到FISH报告，您可能会看到类似下面的示意图（图1）和描述性结果：

基于基因扩增、缺失、融合、断裂四种变异类型及其对应的生物学功能，科研人员开发了针对不同基因的特异性探针，并采用红、绿荧光信号标记相应基因片段。当基因发生变异时，红绿信号会呈现不同表现模式，如信号叠加、分离，或单一信号数量增减等形态变化。这些变化最终以红、绿、蓝三色构成的示意图呈现于FISH报告中（图1），其中蓝色信号代表细胞核。临床医生通过分析红绿信号的表现模式及数量特征，判断其阳性或阴性结果，从而为临床治疗决策提供参考依据。报告解读关键点：

检测目标：报告会清晰列出检测了哪些基因（如JAK2 exon14, CALR exon9, MPL exon10 等）。

信号描述：描述在分析的细胞中，观察到的荧光信号模式（如红色信号数量、绿色信号数量、信号是否融合/分离/缺失等）。

结果判定：会明确给出“阳性”或“阴性”的结论。阳性表示检测到了该基因的特定异常（如JAK2 V617F突变阳性，CALR突变阳性等）。

阈值：报告会注明判断阳性的标准（即需要有多少比例的细胞显示异常信号才算阳性），这是质量控制的重要部分。

临床意义简述：规范的报告通常会简要提示该结果对诊断、预后或治疗的潜在意义（例如：“JAK2 V617F突变阳性，支持PMF诊断，提示可能对JAK抑制剂治疗敏感”）。

医生会根据信号模式、数量以及是否超过设定的阈值，结合您的其他检查结果，综合判断基因状态，为您的诊疗方案提供核心依据。

四、检查过程与费用：简单灵活，价值明确

对于原发性骨髓纤维化患者，FISH检测本身无需额外承受痛苦。医生通常会使用您骨髓穿刺时已获取的样本（偶尔可用含足够异常细胞的外周血）在实验室进行^[3]。样本经特殊处理（如低渗、固定、脱水）后，与荧光探针混合杂交，最终由专业人员在高倍显微镜下观察分析细胞（通常200-500个）^[¹^]。

关于费用，它主要取决于检测基因的数量（如单查JAK2约800-1500元，组合套餐如JAK2+CALR+MPL+其他则需2000-5000元）和医院级别/地区。请务必遵医嘱选择必要的检测组合。部分项目可能纳入地方医保，建议咨询医院医保办。虽然费用需要考虑，但FISH提供的精准基因信息对确诊、判断预后、指导靶向治疗至关重要，其带来的临床获益通常远大于检测成本。荧光原位杂交（FISH）技术如同一位精准的“基因侦探”，在微观世界里让导致骨髓纤维化的关键基因异常无处遁形，发出指引治疗的“荧光信号”。对于原发性骨髓纤维化患者，这项检查并非可有可无。它是医生手中一把关键的钥匙，能打开精准诊断、预后评估和靶向治疗的大门，为对抗这一复杂疾病提供科学依据和个性化方案。

参考文献：[1]中国抗癌协会血液病转化医学专业委员会,中国老年医学学会病理学分会,中华医学会血液学分会. 荧光原位杂交技术在血液肿瘤中的应用规范（2024年版）[J]. 白血病·淋巴瘤,2024,33(04)：193-198.DOI:10.3760/cma.j.cn115356-20231124-00083

[2]吴君颖, 肖志坚. 原发性骨髓纤维化预后评分系统的研究现状 [J] . 国际输血及血液学杂志, 2019, 42(4) : 277-282. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-419X.2019.04.001.

[3]Rack KA , van den Berg E , Haferlach C ,et al. European recommendations and quality assurance for cytogenomic analysis of haematological neoplasms[J]. Leukemia, 2019,33(8):1851-1867. DOI: 10.1038/s41375-019-0378-z